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原代細胞凍存液的制備、使用與保存

更新時間:2023-09-18      點擊次數:566
  原代細胞凍存液的制備和使用對于細胞的保存和復蘇具有重要意義。以下是制備和使用原代細胞凍存液的步驟:
 
  制備:
 
  準備所需試劑和器材,包括DMSO、FBS、培養基、離心管、移液管、細胞計數板、顯微鏡等。
 
  收集細胞樣品,加入適量培養基進行洗滌。
 
  棄去培養基,加入適量DMSO和FBS混合液進行細胞凍存液的制備。
 
  將細胞凍存液分裝到凍存管中,每個凍存管中加入1毫升細胞凍存液,標記好凍存管。
 
  將凍存管放入梯度凍存盒中,然后保存至-80℃過夜(如果沒有凍存盒,可以先在4℃冰箱放置30 min,然后轉移至-20℃放置1-2 h,最后轉移至-80℃過夜),第二天取出放入液氮罐,并記錄好位置信息。
 
  使用:
 
  準備所需器材和試劑,包括細胞凍存液、離心管、移液管、培養基等。
 
  從液氮罐中取出凍存管,迅速放入37℃水浴鍋中進行復蘇。
 
  復蘇后,將細胞轉移至培養基中進行培養。
 
  保存:
 
  在復蘇后數小時內將細胞傳代并培養,以便快速擴增和存儲。
 
  可以將細胞保存在常規培養箱中,但需要注意溫度和濕度的控制。
 
  可以使用細胞凍存盒將細胞保存于-80℃冰箱中,以延長細胞的存活時間。
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